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대장균 세포분열 조절에 관여하는 DicA 단백질은 37°C보다 25°C에서 DNA에 더욱 잘 결합한다. 그러나 DicA 단백질의 온도의존적 DNA 결합에 대한 분자적 원인은 명확하지 않다. 본 연구에서는 DicA 단백질이 어떻게 DNA에 결합하며, 왜 온도 의존적 결합양상을 보이는지 알아보았다. In vivo DNA 결합 분석 결과 RovA나 SlyA와 같은 DicA의 상동성 단백질과는 달리 DicA는 N 말단에 있는 DNA 결합 도메인을 이용하여 20개의 염기쌍으로 이루어진 dicC 조절자 유전자(Oc)에 결합함을 보여주었다. 또한 in vivo 실험에서 DicA는 37°C보다 25°C에서 DNA에 더 잘 결합하는 것으로 알려진 Cnu 또는 H-NS의 영향을 받지 않고 자체적으로 Oc에서의 온도 의존적 DNA 결합을 보인다. 하지만 정제된 DicA 단백질을 이용한 in vitro binding 실험에서는 온도 의존적 DNA 결합이 관찰되지 않았다. Crude 단백질을 이용한 실험에서 DicA 단백질의 온도 의존적 DNA 결합이 관찰되는 것으로 보아 DicA의 온도의존적 DNA (Oc) 결합은 crude 단백질내에 존재하는 아직 알려지지 않은 in vivo factor에 의해 일어난다.
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재료 및 방법
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References
참고문헌 (18)
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Azam TA / 1999 / Twelve species of the nucleoidassociated protein from Escherichia coli. Sequence recognition specificity and DNA binding affinity / J. Biol. Chem 274:33105~33113
Bejar S / 1985 / A new dispensable genetic locus of the terminus region involved in control of cell division in Escherichia coli / Mol. Gen. Genet 201:146~150
Bejar S / 1988 / Cell division inhibition gene dicB is regulated by a locus similar to lambdoid bacteriophage immunity loci / Mol. Gen. Genet 212:11~19
Bejar S / 1986 / Control of cell division in Escherichia coli. DNA sequence of dicA and of a second gene complementing mutation dicA1, dicC / Nucleic Acids Res 14:6821~6833
Bouche F / 1989 / Genetic evidence that DicF, a second division inhibitor encoded by the Escherichia coli dicB operon, is probably RNA / Mol. Microbiol 3:991~994
Bejar S / 1985 / A new dispensable genetic locus of the terminus region involved in control of cell division in Escherichia coli / Mol. Gen. Genet 201:146~150
Bejar S / 1988 / Cell division inhibition gene dicB is regulated by a locus similar to lambdoid bacteriophage immunity loci / Mol. Gen. Genet 212:11~19
Bejar S / 1986 / Control of cell division in Escherichia coli. DNA sequence of dicA and of a second gene complementing mutation dicA1, dicC / Nucleic Acids Res 14:6821~6833
Bouche F / 1989 / Genetic evidence that DicF, a second division inhibitor encoded by the Escherichia coli dicB operon, is probably RNA / Mol. Microbiol 3:991~994
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